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第三节 革兰阳性杆菌（第3页）

（2）核酸检测：用PCR法快速诊断结核分枝杆菌感染。该法特异性和敏感性均大于95%。

（3）抗PPDlgG的检测：用ELISA法检测患者血清中抗PPDlgG抗体可作为活动性结核分枝杆菌感染的快速诊断方法之一。肺结核病人的血清阳性率为80%~90%。

2．分离培养：固体培养基培养法和液体培养基培养法。

3．鉴定：PCR反向膜探针杂交ELISA法；DNA探针；16srRNA基因序列测定；高效液相色谱（HPLC）检测分枝菌酸。

4．药敏：结核分枝杆菌耐药株的增多使结核病成为威胁人类健康的一大杀手。结核分枝杆菌菌株应做药敏试验，以指导临床合理用药。

产单核李斯特菌（Listeriamonocytogenes）

产单核李斯特菌广泛分布于自然界、水、土壤、人和动物粪便中，它隶属于李斯特菌属，该属包括8个种，其中只有产单核李斯特菌对人有致病性。人类李斯特菌的主要传染源是健康带菌者，传播途径是粪一口，产单核李斯特菌也可通过胎盘和产道感染新生儿，引起新生儿化脓性脑膜炎、败血症性肉芽肿等，死亡率较高。与病畜接触可致眼和皮肤的局部感染。妊娠妇女感染后可引起流产。

该菌偶尔还引起成人心内膜炎、败血症、结膜炎等。

1．分离培养：将血液标本（3~5ml）或脑脊液的离心沉淀物接种两支脑心浸液（标本量的IO倍）培养基中。其中一支置10%C02环境中，37℃培养24~48h，各作一次血平板分离：另一支置4℃培养，每24h作一次血平板分离：连续4天，以后每周一次至四周。咽喉拭子、组织及粪便接种于肉汤培养基中，置4℃培养，进行冷增菌，转种和培养方法同上。从血平板上挑取有β溶血环的菌落，做涂片染色镜检并进一步鉴定。

2．鉴定：触酶阳性，在血琼脂上有狭窄的β溶血环可在4℃冷增菌生长，25℃有动力，37℃无动力或动力缓慢。CAMP试验阳性。

3．药敏：首选氨苄青霉素，此外青霉素、链霉素、四环素、氯霉素和红霉素等也敏感，磺胺、杆菌肽和多粘菌素耐药。

丹毒丝菌属（Erysipelothrix）

本菌属包括猪红斑丹毒丝菌（E。rhusiopathiae）和扁桃体丹毒丝菌（E。tonsillarum）o猪红斑丹毒丝菌是这个属中唯一感染人的一个种。

猪红斑丹毒丝茵（E。rhusiopathiae）

猪红斑丹毒丝菌是红斑丹毒丝菌病的病原，是一种急性传染病，主要发生在鱼类、家畜、家禽和兔类，人类也可感染发病，但机会有限，主要因接触动物或其产品经皮肤损伤而引起类丹毒。以引起局部感染为主，全身感染者少见。偶可引发关节炎、心内膜炎和急性败血症。

1．涂片检查：革兰阳性杆菌，菌体细长，长短不一，单个存在或形成短链，有时可形成长丝状，且有分枝及断裂，与放线菌形态相似。

2．分离培养：初次分离要在厌氧环境下，传代后可在有氧环境中生长，在含有葡萄糖或血液的培养基中生长较好。

3．鉴定：触酶阴性，克氏双糖管中产硫化氢，分解阿拉伯糖，动力阴性。

4．药敏：对青霉素、头孢菌素、红霉素和四环素等均敏感。

加特纳菌属（Gardnerella）

**加特纳菌（G．vaginalis）是加特纳菌属中仅有的一个菌种。

1．**加特纳菌是引起非淋菌性**炎的主要病原菌之一，其诊断依据是：**排出物增多，稀薄、均质、灰白色，有恶臭味，PH>4。5；有线索细胞，即**上皮细胞被革兰阴性小杆菌覆盖；胺试验阳性：10%KOH滴到**分泌物上，立即出现鱼腥味和氨味。

2．一般在诊断细菌性**炎时，常作临床简易试验协助诊断，不需作分离培养，这是因为无症状的妇女也常可培养出**加特纳菌。患细菌性**炎的妇女**加特纳菌呈100~1000倍增加，提示在细菌性**炎中本菌可能起重要作用。细菌性**炎可导致多种严重的妇科并发症，如子宫全切术后感染、绒毛膜炎、羊水感染、早产等，还能引起新生儿致死性和非致死性败血症等。

1．**加特纳菌革兰染色从阴性到弱阳性，一般说来，实验室保存菌株趋向革兰阴性，新鲜临床标本中分离的菌株趋向革兰阳性，在高浓度血清中生长的菌株呈革兰阳性。

2．直接湿片镜检：取**分泌物加一滴或数滴生理盐水混合涂片，在高倍镜下观察，细菌性**炎患者可见大量**上皮细胞，少量脓细胞及无数成簇的小杆菌群集或吸附于上皮细胞表面，致使细胞边缘晦暗，呈锯齿形，即为线索细胞，提示**加特纳菌感染。

3．涂片染色镜检：取**分泌物涂片，干燥后固定革兰染色，若有革兰染色不定小杆菌及其他革兰阴性杆菌、弧菌或革兰阳性细菌，而革兰阳性大杆菌（乳酸杆菌）缺乏或仅有l~5个的混合细菌群，可提示为细菌性**炎。

4．药敏：所有菌株对氨苄青霉素、羧苄青霉素、苯唑青霉素、青霉素、万古霉素和甲硝唑敏感；对奈啶酸、新霉素、多粘菌素和磺胺耐药。